小干扰RNA沉默组织因子基因对肝癌侵袭转移能力的影响

• 作者: 周奇 周祥兵 彭宝岗 梁力建 王亚峰
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 凝血致活酶 RNA干扰 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2011,（35）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2497-2500
• 分类号: R4
• 字数: 3685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.35.015

摘要

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人类肝癌细胞内组织因子(TF)基因表达，从而探讨对其侵袭转移能力的影响。方法 本实验以人类肝癌细胞系HepG2细胞株为实验对象，将携带有针对TF小干扰RNA( siRNA)序列的质粒pGPU6/GFP/Neo-TF siRNA，转染HepG2细胞株，以适当浓度的G418筛选获得阳性克隆，通过RT-PCR和蛋白质印迹法比较转染TF siRNA(+)质粒、转染TF siRNA( -)质粒以及未转染任何质粒的HepG2细胞内源性TF在基因及蛋白质表达水平的差异，进而应用Transwell体外侵袭实验检测三者的侵袭转移能力，探讨TF对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。结果 (1) RT-PCR结果 显示，转染TF siRNA(+)质粒的HepG2细胞其内源性TF表达水平低于转染TF siRNA（-）质粒和未转染质粒的表达水平。(2)蛋白质Western印迹法结果 显示，转染TFsiRNA(+)质粒的HepG2细胞其内源性TF蛋白表达水平低于转染TF siRNA( -)质粒和未转染质粒的表达水平。(3) Transwell体外侵袭实验结果 显示，转染TF siRNA(+)质粒的HepG2穿膜细胞数[(14±10)个]少于转染TF siRNA（-）质粒的HepG2穿膜细胞数[(128±18)个]，经t检验比较，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。这提示应用RNA干扰技术抑制肿瘤细胞TF表达可以使HepG2细胞侵袭转移能力显著下降。结论 TF与肝癌细胞的侵袭转移能力密切相关，应用RNA干扰技术抑制其表达可以明显降低细胞HepG2体外侵袭转移能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁力建	中山大学附属第一医院肝胆外科	298	2273	21.0	33.0
2	彭宝岗	中山大学附属第一医院肝胆外科	150	913	16.0	23.0
3	周奇	中山大学附属第一医院肝胆外科	42	158	7.0	10.0
4	周祥兵	中山大学附属第一医院肝胆外科	3	17	2.0	3.0
5	王亚峰	中山大学附属第一医院肝胆外科	3	7	1.0	2.0