应用正交设计筛选hTERT基因siRNA最佳作用位点

• 作者: 吴斌华 周克元 李祥勇
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA 正交实验 人端粒酶逆转录酶 MTT
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1527-1530
• 分类号: R34
• 字数: 3013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2011.12.009

摘要

目的 筛选针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的最佳siRNA作用位点和作用浓度.方法 分别选取hTERT基因上3个不同位点的序列,设计为shRNA表达质粒.然后采用SPSS 11.5统计软件设计正交实验,质粒种类、质粒浓度和时间为影响因素,它们的水平均是3个.用脂质体法将质粒转染入鼻咽癌细胞系CNE-2Z内,以MTT法检测细胞生长抑制率.同时以RT-PCR实验验证结果.结果 作用于hTERT亚基2474～2489位点的质粒pmU6- hTERT-3在浓度为0.2 μg/μL作用24 h的siRNA抑制作用效果最好.结论 以正交实验统计原理来筛选siRNA最佳作用位点操作简单方便.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周克元	广东医学院生物化学和分子生物学研究所	210	1945	22.0	36.0
2	吴斌华	广东医学院检验学院	28	132	6.0	10.0
3	李祥勇	广东医学院生物化学和分子生物学研究所	24	113	6.0	9.0