大鼠心肌细胞钙调磷酸酶Aβ基因的克隆与真核表达

• 作者: 于波 尹新华 曹威 栾颖
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙调磷酸酶 RT-PCR 真核表达
• 年，卷（期）: 2011,（25）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3075-3077,3081
• 页数: 4页
• 分类号: R-332
• 字数: 2895字
• 语种: 中文

摘要

目的 从原代培养的大鼠心肌细胞中扩增钙调磷酸酶( Calcineurin,CaN)Aβ cDNA序列,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-CaN,并检测其表达情况,为进一步研究CaN及其在心肌损伤的信号转导途径中的作用奠定基础.方法 用RT-PCR方法从原代培养的大鼠心肌细胞RNA中扩增出CaN A β cDNA序列,测序后将其用限制性内切酶双酶切,然后与真核表达质粒pcDNA3.1(+)进行连接,再转化DH5α,将鉴定为阳性的真核表达质粒转染人胚肾293T细胞,用免疫荧光细胞化学技术检测其表达情况.结果 ①将鉴定为阳性的质粒进行测序后,所测序列结果与GeneBank的CaNAβ基因序列同源性达到91.7%；②真核表达载体pcDNA3.1-CaN转染293T细胞后经免疫荧光细胞化学染色检测到钙调磷酸酶基因在人胚肾293T细胞中表达.结论 正确克隆出了大鼠心肌细胞CaNAβ基因并建立了CaNAβ基因的真核表达栽体pcDNA3.1-CaN.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹新华	哈尔滨医科大学附属第一医院心内科	59	216	8.0	12.0
2	于波	哈尔滨医科大学附属第二医院心内科	184	671	11.0	19.0
3	栾颖	哈尔滨医科大学附属第二医院心内科	21	40	4.0	5.0
4	曹威	哈尔滨医科大学附属第二医院心内科	16	39	4.0	5.0