抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究

• 作者: 史琪琪 张秀敏 李增山 林慧 王军伟
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白 聚合 降解 稳定
• 年，卷（期）: 2011,（23）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4401-4404
• 分类号: R730.51
• 语种: 中文

摘要

目的:对MAGE1-MAGE3-HSP70(M1-M3-HSP70)融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究,为后期的临床前试验提供数据和依据.方法:以本实验室构建的菌种(BL21(DE3)pLysS - M1-M3-HSP70)为材料,采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达,用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳、免疫印迹(Western blotting)对目的蛋白进行分析,然后确定盐析条件,使用Butyl Sepharose HP疏水相互作用层析以及阴离子交换(Source 30Q填料)对目的蛋白的纯化进行分析.结果:M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后,目的蛋白分为两部分,一部分为包涵体形式(44.9％),一部分为可溶表达(55.1％).对其可溶部分进行研究发现,细菌裂解后,目的蛋白存在聚合和降解现象；确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围,基本确定了目的蛋白的纯化工艺.结论:明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质,确定了目的蛋白的纯化方法,为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军伟	第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室	6	17	3.0	4.0
2	张秀敏	第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室	53	243	8.0	11.0
3	李增山	第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室	49	273	8.0	14.0
4	史琪琪	第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室	2	7	1.0	2.0
5	林慧	第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室	4	10	2.0	3.0