PEP-1介导血红素加氧酶-1导入肝细胞的实验研究

• 作者: 唐俊明 张林菲 曾天才 王卫星 郑飞 郭凌郧 陈先祥
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 血红素加氧酶 PEP-1肽 蛋白转导 肝细胞
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 411-414,418
• 分类号: R-33
• 字数: 5414字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2011.03.004

摘要

目的:采用体外培养的L02肝细胞株,研究PEP-1肤介导血红素加氧酶-1(PEP-1-HO-1)穿透肝细胞的能力.方法:实验分为PEP-1-HO-1组和HO-1组,用基因工程的方法制备并纯化PEP-1-HO-1融合蛋白,将纯化的目的蛋白及HO-1蛋白加入培养的L02肝细胞,通过免疫荧光及western blot来分析其转导能力.结果:经测序分析证实,原核表达质粒pET15b-PEP-1-HO-1重组成功.SDS-PAGE及western blot结果表明,PEP-1-HO-1在Rosetta(DE3)pLysS菌中获得了高效表达,经Ni2+-NTA-树脂柱亲和层析纯化得到了融合蛋白PEP-1-HO-1,将其加入到体外培养的L02肝细胞培养基中,发现它能以剂量依赖及时间依赖的方式转导入细胞内,并能持续稳定表达48h,免疫组化显示其主要分布于胞质和胞核中,结论:PEP-1-HO-1融合蛋白能高效地转导入培养肝细胞,为进一步研究肝细胞氧化应激损伤防治的动物模型实验提供了新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王卫星		276	1128	14.0	18.0
2	陈先祥		36	188	6.0	12.0
3	曾天才		2	3	1.0	1.0
4	唐俊明		27	82	5.0	8.0
5	张林菲		10	22	3.0	4.0
6	郑飞		5	7	1.0	2.0
7	郭凌郧		5	7	1.0	2.0