柯萨奇-腺病毒受体不同胞内功能域缺失突变载体的构建与表达

• 作者: 王蓓蓓 王鸿雁 范良生 陈刚
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 柯萨奇-腺病毒受体 功能域缺失突变重组体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1945-1949
• 分类号: R373
• 字数: 3954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2011.15.003

摘要

目的 以柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)蛋白结构的功能解析作为切入点,构建不同CAR胞内域缺失突变的表达载体.方法 利用定点缺失突变策略构建CAR胞内域PKC、CK2、TYR磷酸化位点的缺失突变体及胞内域完全缺失的突变体.利用三步PCR法扩增获得相关的基因片段后,将其克隆入真核表达载体 pcDNA3.1/V5/His,通过双酶切及测序进行鉴定后,分别转染至低表达CAR的人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,并用Werstern blot检测细胞转染后CAR的表达水平.结果 所有突变体经过测序分析均证实序列与设想的突变序列相符,各突变体在SKOV3细胞中获得了满意的表达.结论 成功构建不同CAR胞内功能域缺失突变表达载体,为后续研究CAR及其胞内不同功能域在卵巢癌中的作用机制提供了研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈刚	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心	236	1519	18.0	24.0
2	范良生	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心	7	34	4.0	5.0
3	王鸿雁	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心	8	23	2.0	4.0
4	王蓓蓓	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心	10	27	2.0	4.0