抗犬Ⅰ型腺病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

• 作者: 任文陟 刘殿峰 刘颖 李晓叶 艾纯旭 蓝田丰 袁宝 陈健
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬Ⅰ型腺病毒 杂交瘤 单克隆抗体 酶联免疫法:鉴定
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医—研究报告
• 页码范围: 31-34
• 分类号: QS11
• 字数: 3431字
• 语种: 中文

摘要

为制备抗犬Ⅰ型腺病毒单克隆抗体,将犬Ⅰ型腺病毒(CAV-Ⅰ)细胞培养液饱和硫酸铵沉淀,差速离心浓缩,氯化铯密度梯度离心的方法纯化后免疫BALB/c小鼠,三免后效价过1:10000即可取脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇(PEG)作用下融合,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,有限稀释法亚克隆,制备单克隆抗体,并对制备完成的单克隆抗体进行生物学特性鉴定.获得2株能稳定分泌抗CAV-I的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为C8、E9,经鉴定其亚型分别为IgG1和IgG2a.间接ELISA检测效价,2株单抗细胞上清液效价为1:3200～1:6400,腹水效价为1:25600 ～1:51200.该单克隆抗体与CDV、FPV、FCV病毒均无交叉反应.实验成功制备了抗CAV-Ⅰ单克隆抗体,为进一步建立相关诊断方法奠定了基础.