多次胶原酶消化法培养小鼠椎间盘髓核细胞

• 作者: 吴文坚 张兴凯 曹鹏 梁裕 王君
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 椎间盘退变 椎间盘髓核细胞 体外培养 Ⅱ型胶原 聚合蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（28）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 5136-5140
• 分类号: R318
• 字数: 6054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.28.002

摘要

背景:椎间盘为无血运组织,椎间盘髓核细胞为分化终末细胞,细胞增殖能力较差,体外培养难度较大.目的:探索小鼠椎间盘髓核细胞体外分离培养的方法.方法:取小鼠椎间盘髓核组织,使用多次胶原酶消化的方法,分离培养髓核组织细胞,接种,传代,取第2代细胞,分别采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测椎间盘髓核细胞特征性分泌物Ⅱ型胶原和聚合蛋白的分泌量及mRNA的表达,并与软骨细胞,成骨细胞及成纤维细胞进行比较.结果与结论:椎间盘髓核细胞贴壁后呈现软骨细胞的形态;Ⅱ型胶原和聚合蛋白染色均为阳性;Ⅱ型胶原和聚合蛋白mRNA表达与软骨细胞相同,与成纤维细胞和成骨细胞存在明显差别.说明多次胶原酶消化的方法可以获得大量纯净的椎间盘髓核细胞,性状稳定.