siRNAi沉默DNMT1基因对肺癌细胞WIF-1启动子甲基化的影响

• 作者: 刘煜亮 唐春兰 宫亮 杨和平 王海晶
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 肺肿瘤 启动区遗传学
• 年，卷（期）: 2011,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1266-1268
• 分类号: R73
• 字数: 3765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.13.007

摘要

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMT1)siRNAi对人肺癌A549细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子高甲基化的影响.方法 利用pSilencer 4.1-CMV neo载体,通过siRNAi表达载体法制备DNMT1 siRNAi.将DNMT1 siRNAi转染肺癌A549细胞,采用RT-PCR和Western blot检测观察转染前后肺癌A549细胞DNMT1内DNMT1基因的表达改变,并利用甲基化PCR,直接测序法检测WIF-1基因启动子甲基化水平.结果 构建的DNMT1 siRNAi转染肺癌A549细胞后,明显抑制DNMT1基因的表达,mRNA表达下降75%,蛋白表达下调82%;同时,WIF-1基因启动子序列较转染前甲基化水平明显降低.结论 靶向DNMT1的siRNAi可明显下调靶基因DNMT1的表达,并逆转WIF-1基因启动子高甲基化水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨和平	第三军医大学西南医院呼吸科	135	1059	16.0	26.0
2	王海晶	第三军医大学西南医院呼吸科	13	127	6.0	11.0
3	宫亮	第三军医大学西南医院呼吸科	34	364	10.0	17.0
4	唐春兰	第三军医大学西南医院呼吸科	23	257	9.0	15.0
5	刘煜亮	第三军医大学西南医院呼吸科	1	3	1.0	1.0