结核分枝杆菌Rv1759c结构域与IL-2融合蛋白的表达与鉴定

• 作者: 师长宏 张彩勤 毛峰峰 江鹰 白冰 赵勇 赵善民 陈涛
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分支杆菌 Rv1759c IL-2 潜伏感染
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1001-1004
• 分类号: Q51|Q93|R378.911
• 语种: 中文

摘要

目的:构建结核分枝杆菌(MTB)Rv1759c结构域(Rv1759cD domain,Rv1759cD)于人IL-2(hIL-2)融合基因,并在大肠杆菌中表达获得重组的融合蛋白Rv1759cD-IL-2.方法:用PCR方法从MTB H37Rv基因组扩增Rv1759cD基因片段,测序后与hIL-2基因构建融合基因,并克隆到表达载体pProEX HTa.融合基因在大肠杆菌DH5α中诱导表达,经SDS-PAGE分析后,分别与HismAb、IL-2mAb和结核病人血清进行Western-blot鉴定,采用Ni.NTA亲和层析纯化蛋白.结果:获得的Rv1759cD基因经测序与GenBank公布的序列完全一致,与hlL-2基因连接后,构建的融合基因在大肠杆菌中有效表达.表达蛋白相对分子量为30KDAa,与预测值相符;Western-blot结果显示,在相对分子量30KDAa处分别与His mAb和鼠抗IL-2mAb形成结合带,并与结核病人血清出现特异性结合.通过Ni-NTA亲和层析,可得到纯化的目的蛋白.结论:成功表达、纯化和鉴定了Rv1759cD-IL-2融合蛋白,并有可能作为新型结核病疫苗的靶抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师长宏	第四军医大学实验动物中心	145	694	13.0	16.0
2	赵勇	第四军医大学实验动物中心	74	352	10.0	14.0
3	白冰	第四军医大学实验动物中心	35	127	6.0	9.0
4	毛峰峰	第四军医大学实验动物中心	27	140	7.0	11.0
5	江鹰	第四军医大学实验动物中心	14	54	4.0	6.0
6	张彩勤	第四军医大学实验动物中心	42	102	5.0	7.0
7	赵善民	第四军医大学实验动物中心	15	30	2.0	4.0