解脲支原体、人型支原体、生殖支原体多重PCR检测模板的建立

• 作者: 顾华爱
• 来源期刊: 中国现代医生
• 学科: 医学
• 关键词: 解脲支原体 人型支原体 生殖支原体 多重PCR
• 年，卷（期）: 2011,（18）
• 所属期刊栏目: 检验与临床
• 页码范围: 127-128
• 分类号: R691.3|R375+.3
• 字数: 2742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-9701.2011.18.057

摘要

目的 建立解脲支原体(urealytium;Uu)、人型支原体(mycoplasna hominis，Mh)、生殖支原体(mycoplasma genitalium,Mg)多重PCR检测模板，为临床泌尿生殖道支原体感染的筛选及检测提供便利的多重PCR方法。方法 采用Uu、Mh、Mg提取目的 RNA，采用定量荧光PCR技术进行目的 基因扩增，进行纯化回收后构建多重PCR检测模板，对构建条件进行优化组合，并对临床样本进行检测，评价多重PCR检测的灵敏度。结果 建立多重PCR模板最优扩增条件为50 mM Tris-HCl(pH8.0)，50 mM KCl，4 mM MgCl2，10 mM DTT。引物浓度各为0.5μl/L，反应条件93℃，退火温度55℃，反应40个循环。建立后的多重PCR检测模板上检测靶基因通过特异引物均能进行特异性扩增，目的 条带清晰，灵敏度检测显示其灵敏度为100％。结论 通过目的 基因扩增、纯化能够建立满足临床检验需要的Uu、Mh、Mg多重PCR检测模板，提高临床检测效率。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾华爱	宁波市北仑区中医院检验科	5	8	2.0	2.0