对位红抗原合成和多克隆抗体的制备

• 作者: 刘洪斌 唐宇 张洁 杨曙明 梁琳 沈红 程玛丽 邱静
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 对位红 多克隆抗体 酶联免疫吸附分析法
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 食品-研究报告
• 页码范围: 82-86
• 分类号: S859.84
• 字数: 4502字
• 语种: 中文

摘要

为制备一种特异性强的抗对位红的多克隆抗体,采用混合酸酐法将活化的对位红半抗原与阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)偶联成免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体,利用紫外分光光度计分析结合物的结合情况,间接ELISA和间接竞争ELISA分析抗体特性.发现紫外扫描分析的免疫原对位红与蛋白结合的偶联率为14:1,间接竞争ELISA法分析多克隆抗体效价达到l×106,50%抑制率检测限为7.43 ng/mL,检测的对位红线性范围在0.1 ng/mL～1 μg/mL,抗体与对位红和苏丹红Ⅰ交叉反应率分别为100%和97.8%,与苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和甲苯胺红的交叉反应率很低,与罗丹明类色素无交叉反应.说明制备的对位红多克隆抗体具有很高的特异性,与其他色素交叉反应率低,可用于对位红在食品残留中的检测.