儿童原代白血病细胞体外培养方法的建立

• 作者: 刘双又 刘爱国 张小玲 张柳清 张耀东 熊昊 王冠玲 胡群 胡迎
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 急性白血病 原代细胞 细胞培养 儿童
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1171-1173
• 分类号: R73
• 字数: 3147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2011.09.033

摘要

目的 探讨儿童原代白血病细胞体外分离培养的有效方法,为儿童白血病生物学、细胞遗传学及体外诱导分化等研究提供更好的细胞来源.方法 取25例初诊急性白血病患儿肝素抗凝的骨髓或外周血,以淋巴细胞分离液分离白血病细胞.倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测原代白血病细胞增殖的活性.结果 细胞形态学观察:分离0 h时细胞透亮,折光性强.72 h以内细胞仍为圆形透亮状,但折光性减弱,胞质中出现细颗粒状物质,还可见一些死亡细胞及碎片.之后细胞数量锐减,细胞状态差,液面漂浮很多死细胞.5 d后细胞基本死亡.细胞增殖活力测定提示:同一时间点,高密度细胞组[(4～10)×106·mL-1]较低密度细胞组[(1～2)×106·mL-1]有更高的细胞存活率;而同一细胞密度,24 h细胞状态最好,48～72 h虽有部分细胞死亡,但差异无统计学意义(P＞0.05).胎牛血清对于原代白血病细胞增殖作用优于患者血清,差异有统计学意义(P<0.05).但10%与20%的胎牛血清成分对细胞影响无差异.结论 对于原代白血病细胞的短期体外培养,选择[(4～6)×106·mL-1]细胞密度与含10%胎牛血清的培养基进行培养效果最理想.