血管内皮生长因子121和骨形态蛋白2双基因共表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘丹平 刘素伟 李媛 李晓禹 李谌 钟声
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 人血管内皮生长121基因 人骨形态蛋白2基因 共表达 腺病毒载体 基因治疗 基因重组
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3741-3744
• 分类号: R318
• 字数: 3530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.20.031

摘要

背景:人血管内皮生长因子121和骨形态蛋白2在激素性股骨头坏死骨缺损中均具有成血管成骨作用,目前国内在以人血管内皮生长因子121和骨形态蛋白2基因联合治疗激素性股骨头坏死方面少有报道.目的:构建人血管内皮生长因子121与人骨形态发生蛋白2双基因腺病毒穿梭质粒.方法:将质粒pShuttle-CMV-VEGF121-IRES-hrGFP-1经Kpn Ⅰ/Xba Ⅰ酶切后,将BMP2片段定向连入pShuttle-CMV- VEGF121-IRES,构建可同时表达2个目的基因重组质粒pShuttle-CMV-V EGF121-IRES-BMP2,注入H5a细胞扩增,铺板,筛选阳性菌落,提取质粒,进行酶切分析及序列测定.将已构建确认正确的腺病毒质粒,经BJ5183-AD-1电转感受态细胞进行电穿孔后,铺板,筛选阳性菌落,提取质粒,进行酶切分析,PCR检测和序列分析.结果与结论:酶切分析及核酸序列测定证实重组质粒构建正确,提示实验成功构建了血管内皮生长121及骨形态蛋白2双基因共表达重组腺病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟声	辽宁医学院附属第一医院骨关节外科	2	10	2.0	2.0
2	刘丹平	辽宁医学院附属第一医院骨关节外科	61	259	9.0	13.0
3	刘素伟	辽宁医学院人体解剖教研室	23	127	6.0	10.0
4	李晓禹	鞍山市铁西医院骨二科	1	7	1.0	1.0
5	李谌	辽宁医学院附属第一医院骨关节外科	22	51	4.0	6.0