芹菜RAPD反应体系的优化研究

• 作者: 杨艳君 胡变芳 郭生金 马建华
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 芹菜 RAPD 优化 反应体系
• 年，卷（期）: 2011,（13）
• 所属期刊栏目: 园艺-研究报告
• 页码范围: 204-207
• 分类号: S636.3
• 字数: 2972字
• 语种: 中文

摘要

本试验以一般RAPD反应程序为基础,采用单因素递进筛选方法,针对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、随机引物和DNA模板5个主要影响因素,分别设置5个不同浓度梯度,对芹菜进行RAPD-PCR扩增,建立了芹菜RAPD技术最优体系.结果表明:25 μL反应体系中含Taq DNA聚合酶1.0 U、Mg2+3.0 mM、dNTPs 0.2 mM、引物28 ng、模板DNA 70 ng,10×PCR Bufier 2.5μL;扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,进行42个循环,最后72℃延伸10min.