海马神经干细胞不同传代方法的比较

• 作者: 徐铁军 李梅 王湘臻
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 海马 细胞培养 传代 免疫细胞化学 大鼠
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 985-989
• 分类号: R394.2
• 字数: 5214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.06.009

摘要

背景:体外培养神经干细胞,在悬浮培养时由于自身增殖特性会形成球,传代时将会面临如何将细胞球分离成单细胞的问题.目的:寻求理想的大鼠海马神经干细胞传代方法,以获得大量可增生的神经干细胞以供研究. 方法:分离新生1 d SD大鼠海马神经干细胞,原代培养至五六天时,分别用机械吹打法、胰蛋白酶、TrypLE和Accutase消化法分离神经干细胞球.之后每7 d传代1次,连续传代3次.分别于每次传代后第1天和传代后第4天计数活细胞比例和细胞球数目,实验重复3次. 结果与结论:神经干细胞球经3种酶消化后获得的均是单细胞;经机械吹打后既有单个细胞,也有小细胞球分布于培养液中.在酶消化法中,Accutase消化法传代后神经干细胞的活细胞比例明显高于胰蛋白酶消化(P < 0.01)和TrypLE消化法 (P < 0.05).同时,Accutase消化法传代后新形成的细胞球数目也较其余各组多(P < 0.01).提示在实验条件下,Accutase消化法能够较好地将神经干细胞球分离成存活率较高、能快速形成新的克隆球的单个细胞,是较为理想的神经干细胞分离传代方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李梅	徐州医学院解剖学和神经生物学教研室	36	193	8.0	13.0
2	徐铁军	徐州医学院解剖学和神经生物学教研室	61	333	10.0	16.0
3	王湘臻	徐州医学院解剖学和神经生物学教研室	2	14	1.0	2.0