新疆甜瓜高效再生体系的建立及NPR1/HRP双价抗病基因转化

• 作者: 冯玉杰 沈海涛 王爱英 祝建波
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 甜瓜 再生体系 双价抗病基因 农杆菌介导
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 144-148
• 分类号: S652.603.6
• 字数: 4315字
• 语种: 中文

摘要

以厚皮甜瓜5 d龄无菌苗子叶为外植体,MS和1/2MS为基本培养基,研究了添加6-BA、IAA和卡那霉素不同浓度,进行甜瓜再生体系与根癌农杆菌介导的转化体系的建立.结果表明:甜瓜子叶最适宜的不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L,芽伸长培养基为MS+6-BA 0.75 mg/L+IAA 0.3 mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.3 mg/L,适宜的转化条件为外植体预培养48 h,农杆菌菌液浓度为OD600=0.3～0.4,侵染时间为15 min,22℃暗培养48～55 h.经75 mg/L的卡那霉素筛选,共获得再生甜瓜幼苗21株,其中8棵经PCR鉴定证明NPR1/HRP双价抗病基因已经整合到甜瓜基因组中,即转化率为38%.