CPT-Ⅱ基因4号外显子质粒构建与变异分析

• 作者: 姚敏 姚登兵 姚登福 王理 董志珍
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(CPT-Ⅱ) 外显子4 基因扩增 变异 流感病毒A
• 年，卷（期）: 2011,（50）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9437-9440
• 分类号: R318
• 字数: 4065字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.50.031

摘要

背景:肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)位于细胞线粒体内膜上,是脂肪酸氧化过程中起关键作用的酶之一.目前关于流感病毒感染与CPT-Ⅱ基因变异尚未见报道.目的:构建CPT-Ⅱ第4号外显子(E4)表达质粒及其核苷酸变异分析.方法:从流感病毒感染2例患者外周血中提取DNA,以PCR法扩增CPT-Ⅱ基因的第4号外显子,将其片段插入pGEM-T载体,以T4 DNA连接酶,构建T-CPT-Ⅱ E4,转化大肠杆菌DH5α细胞,增菌,制备质粒,EcoR I酶切、测序和变异分析.结果与结论:成功构建重组表达质粒pGEM-T-CPT-ⅡE4,经DNA测序,证实质粒中插入CPT-Ⅱ第4号外显子完整序列,全长1 305个核苷酸,编码435个氨基酸;与Genebank源序列对照比较,发现含有两个变异位点:1 618(GTC→ATC)和1 858 (TTT→TCT),对应氨基酸为V368I和F448L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董志珍	南通大学医学院诊断学教研室	35	127	5.0	8.0
2	姚登福	南通大学附属医院临床医学研究中心	215	810	11.0	14.0
3	姚登兵	南通大学神经再生重点实验室	17	20	3.0	3.0
4	姚敏	南通大学附属医院医学检验中心	58	173	6.0	9.0
5	王理	南通大学附属医院医学检验中心	36	63	4.0	5.0