鸡IL-2基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测

• 作者: 全舒舟 宋银银 胡俊杰 蒋成砚 谢昆
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡白细胞介素-2 克隆 序列分析 蛋白结构预测
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 畜牧-研究报告
• 页码范围: 5-11
• 分类号: S831|Q78
• 字数: 3376字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中已发表的鸡白细胞介素2(IL-2)mRNA基因序列,利用Premier 5.0软件设计一对特异性引物,采用RT-PCR技术,以ConA刺激的鸡外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出鸡IL-2基因.经琼脂糖凝胶电泳显示扩增片段约为432 bp,分离纯化片段,克隆入pMD-18T载体,转化DH5α感受态细胞,获得阳性重组质粒,经酶切鉴定,测序结果显示,该基因全长432 bp,含有一个432bp的开放阅读框,编码143个氨基酸.生物软件分析结果表明该序列与GenBank中发表的鸡的IL-2的核苷酸序列同源性为98.8%,与黄牛、马、鸡、绵羊、牛、犬、人、山羊、鼠、水牛的核苷酸同源性分别为31.2%、28.2%、273%、30.6%、26.2%、31.7%、30.1%、30.8%、26.6%、30.6%.与GenBank中发表的鸡IL-2编码的氨基酸序列同源性为95.8%,与上述动物的氨基酸序列同源性分别为7.6%、7.6%、9.7%、7.6%、6.9%、lO.4%、11.8%、7.6%、9.0%、7.6%、10.4%.这表明鸡的IL-2基因被成功克隆,它存在着种属特异性.这为进一步研究该基因的生物学作用特别是利用IL-2增强DNA疫苗的免疫效果奠定了基础.