抗菌肽Cecropin A基因原核表达及表达产物的鉴定

• 作者: 陈磊
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 家蝇 Cecropin A 多克隆抗体 融合表达 三羟甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2011,（24）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4549-4552
• 分类号: R318
• 字数: 811字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.24.044

摘要

背景:Cecropins是一种具有抗菌活性的小分子蛋白质.采用真核细胞表达或人工合成Cecropins,效率低、成本高.目的:克隆表达家蝇抗菌肽基因Cecropin A,并对其重组表达产物进行鉴定.方法:依据GenBank中家蝇Cecropin A基因序列设计特异性引物,用RT-PCR从家蝇幼虫组织中扩增Cecropin A成熟肽基因,将其克隆入原核表达载体pET32a中,与表达载体中的Thioredoxin基因构成融合基因,并转化E.coli BL21.经异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导表达.采用家蝇幼虫血淋巴免疫家兔获得抗血清;Western blot和三羟甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定诱导的重组蛋白质.结果与结论:经异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导,E.coli BL21可表达Cecropin A成熟肽,兔抗家蝇幼虫血清、三羟甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot结果证实表达产物为Cecropin A成熟肽.说明使用原核表达系统可以获得天然Cecropin A成熟肽.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈磊	河南中医学院第一附属医院心内科	23	86	6.0	8.0