稳定表达报告基因脂肪间充质干细胞的培养与分子影像鉴定

• 作者: 张荣庆 曹丰 李聪叶 李霜 王亚斌 范伟伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 报告基因 分子影像 干细胞
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 脂肪源性干细胞培养与分化
• 页码范围: 1759-1763
• 分类号: R394.2
• 字数: 5199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.10.011

摘要

背景:研究显示分子影像技术可以在活体细胞和分子水平对干细胞进行定性和定量研究,对干细胞长程监测具有独特优势.目的:构建稳定表达报告基因的脂肪间充质干细胞,并运用报告基因成像等方法实现其体外和移植后的评价与鉴定.方法:繁殖与筛选携带β-actin-luc报告基因小鼠后,采用改良胶原酶消化法分离培养其脂肪间充质干细胞,取第3代细胞行表面标志鉴定;将脂肪间充质干细胞(1×106)植入BALB/c裸鼠后肢肌肉内,采用萤火虫荧光素酶(fluc)生物发光成像进行体外和体内移植后脂肪间充质干细胞的示踪和定量评价.结果与结论:转基因小鼠稳定携带β-actin-luc报告基因,分离培养出的脂肪间充质干细胞高表达CD90及CD44,而CD45、CD34 和CD31呈现低表达,其细胞数与fluc报告基因生物发光信号强度呈显著直线相关(r2=0.96).细胞活体肌肉移植24 h后存活,并显示较强的生物发光信号,在底物荧光素腹腔注射后0～42 min内先迅速增强后平缓减弱,21 min时最强,达(6.92×106±4.11×105) Photons?s-1?cm-2?sr-1.提示由携带β-actin-luc报告基因小鼠脂肪组织分离的脂肪间充质干细胞高表达间充质干细胞表面标志,可在体外和肌肉组织移植后稳定表达该报告基因并实现细胞的分子影像示踪与定量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张荣庆	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	18	109	7.0	10.0
2	李霜	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	4	11	2.0	3.0
3	王亚斌	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	4	3	1.0	1.0
4	曹丰	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	3	6	1.0	2.0
5	范伟伟	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	1	1	1.0	1.0
6	李聪叶	解放军第四军医大学西京医院心血管内科	1	1	1.0	1.0