人胆固醇醋水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染

• 作者: 关宁 冯旭 王瑞 罗俊生 霍晓川 顾立学
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人胆固醇酯水解酶 真核表达载体 单核巨噬细胞 U937细胞 转染
• 年，卷（期）: 2011,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 分类号: R543.5
• 字数: 2309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.26.008

摘要

目的 构建人胆固醇酯水解酶(hCEH)绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-hCEH,并观察其转染单核巨噬细胞株U937后,细胞中hCEH的表达情况.方法 以人肝细胞L-02总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCEH编码区序列,将扩增片段插入到pMD19-T载体中,回收、纯化目的 片段后亚克隆到pEGFP-Nl真核表达载体上,经双酶切、测序鉴定后,转染U937,观察U937中绿色荧光蛋白的表达情况.结果 RT-PCR扩增hCEH基因的编码区序列获得1条约1.7kb的片段,与预期片段大小相符;以pEGFP-Nl为载体,成功构建重组表达质粒pEGFP-Nl-hCEH,该质粒可以在U937中表达.结论 成功构建pEGFP-N1-hCEH,用其转染U937后,细胞中pEGFP-Nl-hCEH大量表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗俊生		60	200	7.0	9.0
2	冯旭		12	36	4.0	5.0
3	关宁		54	204	8.0	10.0
4	霍晓川		41	127	6.0	8.0
5	王瑞		10	48	4.0	6.0
6	顾立学		29	326	10.0	17.0