利用抑制性消减杂交技术分离草莓抗炭疽病相关基因

• 作者: 吴延军 张慧琴 张豫超 张跃建 杨肖芳 王汉荣 苗立祥 蒋桂华
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 草莓 抑制性消减杂交 草莓炭疽病 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2011,（13）
• 所属期刊栏目: 园艺-研究报告
• 页码范围: 183-187
• 分类号: S668.4
• 字数: 4104字
• 语种: 中文

摘要

利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),比较接种炭疽病菌与未接菌草莓之间的基因表达差异,筛选抗草莓炭疽病菌的差异表达基因片段,为草莓抗炭疽病遗传育种提供理论依据.分别提取接种草莓与未接种草莓叶片的总RNA,分离mRNA,逆转录成cDNA,利用RsaI进行酶切,然后以接种叶片酶切cDNA为试验方(tester),以未接菌草莓叶片酶切cDNA为驱动方(driver),构建了草莓抗炭疽病基因消减文库.菌落PCR结果表明,插入片段大部分在1O0～1000bp之间,文库质量好.对文库中1500个阳性克隆进行测序,共得到了1377个有效的ESTs序列.利用NCBI数据库进行Blast同源性比较发现,这些ESTs可能与胁迫反应、信号转导、蛋白合成、蛋白相互作用、物质代谢、跨膜通道、转录因子、金属转运及未知或假定蛋白等有关,ESTs序列的获得为后续草莓抗炭疽病相关基因的克隆、表达和转基因研究提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张慧琴	浙江省农业科学院园艺研究所	52	675	17.0	24.0
2	张跃建	浙江省农业科学院园艺研究所	31	121	6.0	10.0
3	苗立祥	浙江省农业科学院园艺研究所	50	195	7.0	11.0
4	蒋桂华	浙江省农业科学院园艺研究所	74	776	19.0	25.0
5	王汉荣	浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所	94	673	15.0	21.0
6	张豫超	浙江省农业科学院园艺研究所	36	213	7.0	13.0
7	杨肖芳	浙江省农业科学院园艺研究所	45	211	7.0	12.0
8	吴延军	浙江省农业科学院园艺研究所	35	510	13.0	22.0