脯氨酰羟化酶RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 沈晓丽 王厚照 马芳芳
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脯氨酰羟化酶 RNA 干扰 慢病毒 缺氧诱导因子1 克隆
• 年，卷（期）: 2011,（41）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7723-7725
• 分类号: R318
• 字数: 3396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.41.030

摘要

背景:慢病毒载体可稳定介导基因沉默且具有较高的转染效率.目的:构建并鉴定脯氨酰羟化酶 RNA 干扰慢病毒载体.方法:针对脯氨酰羟化酶2 基因序列设计RNA 干扰靶序列,合成靶序列的寡聚DNA,退火形成双链DNA,与经Age Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切的pGCSIL-GFP 连接、转化大肠杆菌感受态细胞,产生重组RNA 干扰慢病毒表达载体,PCR 筛选阳性克隆,测序鉴定.结果与结论:PCR 和DNA 测序证实合成的含脯氨酰羟化酶短发卡RNA 慢病毒载体寡核苷酸链正确插入pGCSIL-GFP 载体.说明实验成功构建脯氨酰羟化酶基因RNA 干扰慢病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王厚照	解放军第174医院检验科	127	238	8.0	10.0
2	马芳芳	解放军第174医院检验科	43	88	6.0	8.0
3	沈晓丽	福建省立医院心血管病重点实验室	19	59	5.0	6.0