纯化和标记抗人轻链β2m单克隆抗体的方法

• 作者: 姚翔 庞荣清 戴莹 汪兴明 潘兴华 阮光萍
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 轻链 单克隆抗体 人类白细胞抗原Ⅰ 纯化 标记 组织工程
• 年，卷（期）: 2011,（24）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4557-4560
• 分类号: R318
• 字数: 1179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.24.046

摘要

背景:通过杂交瘤细胞株接种小鼠腹腔可获得含大量抗体的腹水,但以往纯化腹水中单克隆抗的方法较复杂,不易操作.目的:制备、纯化和标记抗人类白细胞抗原Ⅰ类分子轻链的单克隆抗体,以检测肿瘤细胞表面的人类白细胞抗原Ⅰ类分子的表达.方法:将杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔,获得含抗人轻链β2m抗体的腹水,用改良的辛酸-硫酸铵方法纯化腹水,将纯化后的单克隆抗体标记异硫氰酸荧光素(FITC),标记后的抗体用于检测外周血单个核细胞、表达空载人类白细胞抗原A2分子的T2细胞和白血病K562细胞表面的人类白细胞抗原Ⅰ类分子,并用流式细胞仪和荧光显微镜观察人类白细胞抗原Ⅰ类分子的表达.结果与结论:纯化后的抗人轻链β2m-FITC单克隆抗体纯度为96%.流式细胞检测结果表明,人类白细胞抗原Ⅰ类分子在外周血单个核细胞表面高表达,在表达空载人类白细胞抗原A2分子的T2细胞表面低表达,而在白血病K562细胞表面不表达.结果证实,用改良的辛酸-硫酸铵方法纯化腹水以此制备的抗人轻链β2m-FITC能有效区别不同细胞表达人类白细胞抗原Ⅰ类分子的强弱,其纯化方法简便易行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮光萍	解放军昆明总医院干细胞和组织器官工程研究中心	17	28	4.0	5.0
2	姚翔	解放军昆明总医院干细胞和组织器官工程研究中心	14	18	3.0	4.0
3	戴莹	解放军昆明总医院干细胞和组织器官工程研究中心	5	0	0.0	0.0
4	庞荣清	解放军昆明总医院干细胞和组织器官工程研究中心	13	26	3.0	5.0
5	汪兴明	解放军昆明总医院干细胞和组织器官工程研究中心	1	0	0.0	0.0