量子点荧光双杂交技术检测铜绿假单胞菌的实验研究

• 作者: 府伟灵 张波 罗阳 蒋天伦 陈鸣 高维寅 黄君富 黄庆
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微生物 检测 核酸双杂交 量子点
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1956-1958
• 分类号: R378.99+1
• 语种: 中文

摘要

目的 建立量子点荧光双杂交核酸检测平台,并实现铜绿假单胞菌(PAE)的快速、准确检测.方法 采用巯基法固定铜绿假单胞菌的16S rDNA探针于石英晶体金膜上,加入检测样本进行首次杂交,清洗后加入量子点标记的第二探针进行第2次杂交,最终通过荧光强度以判断PAE是否存在.结果 该量子点双杂交检测平台具有良好的性噪比,其荧光强度与扩增产物的稀释倍数成线性负相关,当PAE扩增产物的稀释倍数在＜10 000倍时具有良好的线性曲线;特异性实验表明,该方法可以将PAE与同源的多种细菌相区分,证明了其高度特异性,方法学比较实验证明,双探针杂交方法的灵敏度和特异性均＞90.0%,已能初步满足临床检测需要.结论 该量子点荧光双杂交核酸检测平台,可有效将PAE与同源的多种细菌相区分,为临床微生物的快速检测提供了一种新的技术方案.