人外周血内皮祖细胞培养方法的建立

• 作者: 刘洋 李琴山 李艳菊
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮祖细胞 细胞培养 外周血 表面抗原 流式细胞仪
• 年，卷（期）: 2011,（46）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8657-8660
• 分类号: R318
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.46.025

摘要

背景:成人外周血来源丰富,但内皮祖细胞含量较少,为使其能够更好的应用于组织工程及细胞治疗,有必要建立外周血内皮祖细胞成熟、稳定的体外扩增体系.目的:建立稳定的人外周血分离、培养和体外扩增血管内皮祖细胞的方法.方法:应用密度梯度离心法,获取外周血单个核细胞,将分选后细胞接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板上,加入内皮祖细胞专用培养基中培养3d 后,洗掉非贴壁细胞,培养至第6 天,收集贴壁细胞,应用倒置显微镜和苏木精-伊红染色进行细胞形态学观察;采用MTT 法和细胞计数测定第1,3 代细胞生长曲线;应用流式细胞仪测定祖细胞和内皮细胞系标志,对培养的细胞进行鉴定.结果与结论:细胞生长曲线测定表明接种后第3 天细胞进入指数增生期,至第6 天进入平台期,随着传代次数的增加,细胞增殖速度变慢,同时表达干细胞表面标志CD34、CD133 和内皮细胞表面标志血管性血友病因子、血管内皮生长因子受体2.证明人外周血可以分离培养内皮祖细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李琴山		25	129	6.0	10.0
2	刘洋		25	103	6.0	9.0
3	李艳菊		15	58	6.0	6.0