Western blot方法检测胞质中细胞色素C含量的改进

• 作者: 修瑞娟 刘亚君
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: Western blot 细胞色素C 大鼠
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 45-46,后插2
• 页数: 3页
• 分类号: Q816
• 字数: 1365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.20.021

摘要

目的:探讨用Western blot技术检测胞质中细胞色素C(Cyt C)的最佳转膜时间.方法:取大鼠小肠上皮细胞,提取胞质蛋白.蛋白定量后,取20μg样品上样于聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE).取22μm孔径硝酸纤维素膜(NC膜),电压100V,分别电转移15、30、60、90、120min.NC膜用丽春红染色,蒸馏水漂洗后加入Cyt C一抗、二抗孵育,放射自显影显色.结果:在转膜过程中,随着时间的增加,转移到NC膜的总蛋白增多;而Cyt C条带出现了先增加(30min),后减少,再增加(120min)的趋势.结论:Cyt C虽然是小分子量蛋白,但Western blot的转膜时间并不需要减少,相反要增加到120min才能得到最佳效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	修瑞娟	中国医学科学院微循环研究所	49	252	10.0	13.0
2	刘亚君	中国医学科学院微循环研究所	2	10	1.0	2.0