铜完全抗原的合成·鉴定及单克隆抗体的制备

• 作者: 任洪林 刘文迪 卢士英 周玉 宋芳 李岩松 柳增善 郝亚明
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: Cu2+ 抗原合成 鉴定 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（29）
• 所属期刊栏目: 资源·环境
• 页码范围: 18072-18074
• 分类号: X753
• 字数: 3397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.29.117

摘要

[目的]获得抗Cu2+的单克隆抗体.[方法]以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸( ITCBE)为双功能螯合剂,使Cu2+分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫原(Cu-ITCBE-BSA)和检测原(Cu-ITCBE-OVA).用非变性聚丙烯凝胶电泳鉴定偶联结果.免疫Balb/C小鼠,通过细胞融合,获得能稳定分泌抗Cu2的杂交瘤细胞株,并通过亲和层析法纯化腹水获得抗Cu2+的单克隆抗体.[结果]获得了1株能稳定分泌抗Cu2+的单克隆抗体的细胞株(4A6),所分泌的抗体亚类为IgG1,细胞培养上清效价可达1:1.0×103,腹水效价可达1:6.4×105.以该细胞株接种Balb/C小鼠腹腔,获得抗Cu2+的腹水型单抗；该腹水经过亲和层析法纯化后,纯度可达95％.[结论]获得了抗Cu2+的单克隆抗体,为环境水样中Cu2+的免疫学检测奠定基础.