真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL,pIRES2-EGFP/CD的构建和鉴定

• 作者: 梁兵 殷建瑞 袁芳 谭丽华 高庆春 高聪
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 真核表达载体 pIRES2-EGFP/TRAIL pIRES2-EGFP/CD
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 21-23
• 分类号: Q343.1+7
• 字数: 2986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.01.011

摘要

目的 构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础.方法 将pCMV/CD质粒和pcDNA3.1(+)/TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测,确定其完整性,并进行序列测定确定有无基因突变.pCMV/CD质粒用Sac Ⅱ/ Xho Ⅰ双酶切,pcDNA3.1(+)TRAIL质粒用BamH Ⅰ/XhoⅠ双酶切,将目的 基因定向克隆到真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,转化E.coli DH5α感受态细胞,通过限制性内切酶双酶切、PCR及核酸序列分析等筛选、鉴定重组质粒.结果 所构建的真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL经Sac Ⅱ/ XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.0、5.2 kb;pIRES2-EGFP/CD经BamH Ⅰ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.3、5.2 kb.PCR及测序证实,pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD质粒基因组中分别包含TRAIL和CD基因.结论 成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高聪	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	92	394	11.0	14.0
2	殷建瑞	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	31	121	5.0	10.0
3	高庆春	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	38	148	7.0	9.0
4	梁兵	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	12	28	3.0	5.0
5	袁芳	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	8	6	2.0	2.0
6	谭丽华	广州医学院第二附属医院神经科学研究所	8	72	4.0	8.0