Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数

• 作者: 仇有文 刘营 张明辉 敖金霞 曲波 袁肖寒 霍楠 高学军
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: Real-time PCR 转基因杂交大豆 拷贝数 Lectin nos终止子基因边界序列
• 年，卷（期）: 2011,（17）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 10150-10152
• 分类号: S188+.1
• 字数: 2517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.17.019

摘要

[目的[采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数.[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数.[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999.nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝.[结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据.