吸附-交联法固定D-泛解酸内酯水解酶的研究

• 作者: 刘萌 别松涛 宋馨宇 张建中 杜连祥 黄云雁 黎明
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: D-泛解酸内酯水解酶 固定化 交联 稳定性
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 28-33
• 分类号: TQ460.38
• 字数: 5292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2012.01.006

摘要

选择6种吸附树脂和离子交换树脂对D-泛解酸内酯水解酶进行固定化,筛选出了固定化效果较好的大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂D-380为载体,用先吸附后交联的方法固定化.通过实验对固定化条件进行了优化,得出最佳的固定化条件为:加酶量6 U/g树脂、吸附pH7.5、吸附时间4h、吸附温度30℃、交联剂戊二醛终浓度0.1％、交联时间2h.实验表明在此条件下制得的固定化酶有很好的稳定性:固定化酶在连续20次的底物水解反应后,剩余酶活达到71％.当温度达到80℃时游离酶几乎失去酶活,而固定化酶剩余酶活为60％以上.游离酶的pH稳定性范围为pH7～8,而固定化酶为pH 6.5～8.5.