暗纹东方纯CD8α基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备

• 作者: 朱江 杜建 邵爱华 陈葵
• 来源期刊: 苏州科技学院学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: CD8α暗纹东方纯 鱼类免疫 原核表达 多抗制备
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 47-56
• 页数: 10页
• 分类号: Q959.489
• 字数: 5183字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-0687.2012.01.011

摘要

CD8是与Ⅰ型主要组织相容性复合体（MHCI）结合，是T细胞表面受体（TCR）的共受体．也是T淋巴细胞表面的重要标志物。该研究报道了暗纹东方纯胸腺等组织中克隆获得CD8αcDNA序列及其相应的基因组序列。克隆到的cDNA序列全长1061bp，包含1个657bp的开放读码框（ORF），编码218个氨基酸；其对应的基因组序列为1533bp，包含5个内含子和6个外显子。生物信息学分析表明，D8d蛋白质序列由信号肽、胞外可变区、铰链区、跨膜区和胞内区5部分组成。胞外区的可变区和铰链区部分各有两个高度保守的半胱氨酸残基，可能参与链内和链间二硫键的形成。氨基酸序列多重比对表明，暗纹东方鲍与其他鱼类的CD80α，特别是与鲽形目鱼类具有较高的同源性。为进一步研究暗纹东方纯CD8的生物学功能，构建了表达CD8α成熟肽胞外区的重组质粒，诱导表达出重组蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫大白兔，制备了抗血清。经间接ELISA法检测抗体效价表明。获得了高效价的特异性暗纹东方纯CD8c~抗体，为进一步研究CD8在鱼类淋巴细胞进化和适应性免疫中的作用奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈葵	苏州大学基础医学与生物科学学院	34	273	10.0	16.0
2	朱江	苏州大学基础医学与生物科学学院	114	733	13.0	22.0
3	杜建	苏州大学基础医学与生物科学学院	3	22	2.0	3.0