重组大肠杆菌P84A/MC1061诱导和表达卤醇脱卤酶的条件优化

• 作者: 余华顺 俞学锋 姚娟 张娅 李啸 李建华 李沛 李知洪 梁运祥
• 来源期刊: 中国酿造
• 学科: 生物学
• 关键词: 卤醇脱卤酶 大肠杆菌 发酵条件 诱导
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 128-131
• 分类号: Q786
• 字数: 2143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0254-5071.2012.02.036

摘要

考察重组工程菌E.coli P84A/MC1061的生长特性,并优化其在卤醇脱卤酶表达过程中的诱导条件和培养条件.在摇瓶发酵中,以阿拉伯糖诱导重组大肠杆菌P84A/MC1061表达卤醇脱卤酶.重点研究培养温度、装液量、摇床转速、培养基初始pH值、诱导时机、诱导剂添加量、诱导剂作用时间对卤醇脱卤酶的表达影响.在培养温度为30℃,装液量为25mL/250mL,摇床转速为200r/min,初始pH值为7.1时,当菌体量OD600值达到2时,按照1‰体积比添加L-阿拉伯糖,诱导培养22h后,发酵液OD值达到21.3,酶活力达到138555.3U/mL.研究发现,培养温度和初始pH值是基因工程菌E.coliP84A/MC1061诱导表达卤醇脱卤酶的显著影响因子,可为卤醇脱卤酶发酵生产的深入研究提供依据.