类芽孢杆菌胞外胆固醇氧化酶的分离纯化

• 作者: 余磊 吕彦茹 周河治 朱萍 李杰民 杨辉 梁海秋 王发合 赵芳
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 类芽孢杆菌 胆固醇氧化酶 分离 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1090-1093
• 分类号: TQ920
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2012.08.1090

摘要

[目的]探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持.[方法]将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学性质.[结果]类芽孢杆菌发酵液经DEAE离子交换柱层析和SephadexG-75凝胶柱层析后,纯化所得的COD比活力达6.83U/mg,酶活力回收为35.6％,纯化倍数为13.4倍.纯化酶经SDS-PAGE显示为均一条带,分子量约58 kDa.将纯化的COD作用于不同浓度胆固醇,采用Lineweaver Burk作图法,测得其Km=3.3×10-5 mol/L.薄层层析结果显示,产物为胆甾-4-烯-3-酮,说明纯化所得酶是COD.[结论]纯化获得电泳纯类的芽孢杆菌胞外COD,其与底物亲和力较强,具有潜在的应用研究价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨辉	广西大学生命科学与技术学院	36	232	9.0	13.0
2	梁海秋	广西大学生命科学与技术学院	31	243	10.0	13.0
3	吕彦茹	广西大学生命科学与技术学院	1	1	1.0	1.0
4	余磊	广西大学生命科学与技术学院	2	1	1.0	1.0
5	赵芳		7	1	1.0	1.0
6	王发合		2	3	1.0	1.0
7	李杰民		12	37	3.0	5.0
8	朱萍	广西大学生命科学与技术学院	18	134	7.0	11.0