赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定

• 作者: 刘运超 张改平 李志西 王耀 胡骁飞 裴亚峰 赵东 邓瑞广
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体随机七肽库 赭曲霉毒素A 模拟表位 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 1271-1277
• 分类号: Q516
• 语种: 中文

摘要

从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位，并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体（OTAmAb）为配基，亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白（PⅢ）上的随机七肽库，以ELISA方法鉴定阳性克隆，并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选，共得到22株与OTAmAb特异结合的阳性噬菌体克隆，且该结合都能够被OTA标品阻断，DNA测序及多肽核心序列分析后，得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为：MPLWXDL，X为任意氨基酸，以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法，线性范围为250～8000pg／ml。基于制备的OTAmAb，利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位，并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。