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吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库构建
吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库构建
作者:
康现江
王瑞
薛雯
钟理
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
肺癌
噬菌体展示
CDNA文库
吸烟者
摘要:
目的:为筛选吸烟人群中早期肺癌肿瘤标志物,构建吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。方法:用RNeasy Mini Kit提取吸烟者肺癌组织总RNA,分离纯化mRNA,逆转录合成双链cDNA,经末端修饰、定向EcoRI/HindIII接头连接、接头消化,使其两端分别带有EcoRI和HindIII粘性末端。用Mini Column分离cDNA片段,收集300 bp以上的双链cDNA,与T7Select 10-3b载体连接,体外包装后,以BLT5615为受体菌得到吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。结果:经测定,库容为1.35 ×106 pfu,扩增后文库滴度为4.4 ×1010 pfu/ml。PCR鉴定从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑,重组率为97%,重组体中91%的插入片段长度>300 bp。结论:成功构建了吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库,为下一步筛选吸烟人群中早期肺癌肿瘤标志物奠定基础。
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吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库构建
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生物医学
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医学
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肺癌
噬菌体展示
CDNA文库
吸烟者
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吸烟者
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生物医学
主办单位:
汉斯出版社
出版周期:
季刊
ISSN:
2161-8976
CN:
开本:
出版地:
武汉市江夏区汤逊湖北路38号光谷总部空间
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创刊时间:
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出版文献量(篇)
99
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