用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型的建立

• 作者: 严惠明 李坤雨 邓庆 陈惠 陈斐 韩泽广
• 来源期刊: 兰州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 荧光素酶 肝癌 移植瘤 活体成像
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 10-15
• 分类号: Q735.7
• 字数: 4537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2812.2012.01.003

摘要

目的 建立可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型.方法 利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL3(LUC/NEO)转染至人肝癌细胞株SMMC-7721、Huh-7、Hep3B、MHCC-97H、HCC-LM6、PLC/PRF/5中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆.根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选合适克隆,进行裸鼠皮下接种,建立肝癌移植瘤模型.利用活体成像系统监测肿瘤的生长转移情况,并对肝脏组织进行HE染色分析肿瘤细胞的生长分布特点.结果 建立了6株肝癌细胞株的荧光素酶基因稳定表达的亚克隆,并且体外验证了各种细胞株中的荧光素酶活性情况；裸鼠皮下成瘤实验显示了SMMC-7721Luc+、Huh7Luc+、PLC/PRF/5Luc+、MHCC-97HLuc+稳定细胞具有成瘤特性；裸鼠肝脏原位注射肝癌细胞(SMMC-7721Luc+、MHCC-97HLuc+、HCC-LM6Luc+、PLC/PRF/5Luc+),利用活体成像系统能够有效对活体肿瘤生长情况进行监测；裸鼠脾动脉注射肝癌细胞(MHCC-97HLuc+、PLC/PRF/5Luc+),利用活体成像系统能够监测到小鼠肝癌模型的生长状况,之后处死小鼠,对肝脏组织HE染色发现肝癌细胞局部分布于肝脏中.结论 本研究成功地构建了可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型,模型稳定可靠、直观、灵敏,为肿瘤生长转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供了重要工具.