羊驼抗H5N1血凝素重链可变区-人IgGFc段嵌合抗体的制备和鉴定

• 作者: 吴标 夏立亮 王颖 程亚庭 蔡家麟 赵国屏
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: H5N1禽流感病毒 重链可变区 人源化抗体 包涵体复性 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在制备羊驼抗H5N1禽流感病毒的重链抗体可变区-人Fc段嵌合体抗体制备,对所得嵌合抗体进行制备和功能鉴定,为临床应用奠定基础.用pET-22b表达载体构建抗H5N1禽流感病毒羊驼重链可变区(VHH)-人IgG1Fc嵌合基因,以包涵体形式表达VHH23-hFc嵌合抗体蛋白,采用优化的方法复性后,获得高纯度VHH23-hFc嵌合抗体,用ELISA法鉴定嵌合抗体亲和力、热稳定性和小鼠体内的半衰期.结果显示,透析复性后原核表达的抗H5N1禽流感病毒VHH23-hFc嵌合抗体亲和力为2.24×106 mol/L,具有较好免疫学活性,热稳定性也较好,小鼠体内半衰期达到35 h,为下一步开展该抗体的体内外病毒中和试验奠定良好基础.