大熊猫和亚洲黑熊TNNC1基因的克隆、表达与序列分析

• 作者: 丁祥 侯万儒 侯怡铃
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 克隆 表达 TNNC1 大熊猫 亚洲黑熊
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 228-238
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

慢肌肌钙蛋白C (Troponin C type 1,TNNC1)具有高度保守性,调控骨骼肌慢肌和心肌的收缩,影响肌蛋白的生成,从而可能导致动物肌肉的生长、进化和功能的差异.本研究以大熊猫和亚洲黑熊骨骼肌为材料,提取总RNA和基因组DNA,运用RT-PCR和Touch-down PCR分别扩增出TNNC1基因的cDNA序列和结构基因序列,并且构建了含有TNNC1 cDNA的重组表达载体,转化进入E.coli BL21进行超表达研究.结果表明大熊猫TNNC1基因的cDNA片段长602 bp,包含一个编码161个氨基酸的开放阅读框,其结构基因全长2 831 bp,包含6个外显子和5个内含子.亚洲黑熊TNNC1基因的cDNA片段长486 bp,亦包含一个编码161个氨基酸的开放阅读框,其结构基因全长2 758 bp,同样包含6个外显子和5个内含子.该两个物种的TNNC1基因与已报道的13种动物的TNNC1基因具有很高的相似性.拓扑预测表明,大熊猫和亚洲黑熊TNNC1蛋白有1个蛋白激酶C磷酸化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个N-豆蔻酰化位点,3个EF手性钙结合域及1个N-糖基化位点.将TNNC1基因在大肠杆菌中表达发现TNNC1蛋白与氮端多聚组氨酸标签蛋白(His6)融合成大小为23.5kD左右的多肽,这与预期结果相一致.本研究结果为进一步深入探讨大熊猫和亚洲黑熊TNNC1基因及蛋白的结构、功能和进化关系提供资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁祥	西南野生动植物资源保护教育部重点实验室西华师范大学生命科学学院	2	4	2.0	2.0
2	侯怡铃	西南野生动植物资源保护教育部重点实验室西华师范大学生命科学学院	2	4	2.0	2.0
3	侯万儒	西南野生动植物资源保护教育部重点实验室西华师范大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0