斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株ORF63基因的序列特征及表达与启动子活性分析

• 作者: 刘惠芬 张志芳 李轶女 江峰 牟志美 王石宝 高绘菊
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株 ORF63基因 序列特征 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 292-298
• 分类号: Q969.436.4|Q78
• 字数: 5947字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2012.02.016

摘要

斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型( SpltMNPVⅡ)分离株是繁殖率和毒力极强的新型病毒株,ORF63是该病毒分离株的一个功能未知基因.从SpltMNPVⅡ分离株基因组中克隆了ORF63.序列分析表明,该基因读码框为1 071 bp,编码356个氨基酸,蛋白质分子质量为41.3 kD;起始密码子ATG上游存在一个早期和晚期启动子基序,编码蛋白序列含有CNX、MutH等多种结构域.启动子活性和转录时相分析表明ORF63是一个早、晚期表达的基因,在病毒感染4h和18 h时有2个转录峰,24h以后转录水平略有下降,但总体趋于稳定.构建该基因的原核表达载体pET-28a-ORF63,并转化大肠杆菌BL21 (DE3),表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体,Western blot检测制备的多克隆抗体特异性较好,效价可达1∶3 200以上.由以上结果推测,SpltMNPVⅡ分离株的ORF63基因是一个早期和晚期均有表达的病毒基因,可能与SpltMNPVⅡ感染宿主细胞后自身DNA的复制有关,参与早期芽生病毒(BV)的发生和晚期包涵体衍生病毒(ODV)的成熟2个过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牟志美	山东农业大学林学院	125	1375	21.0	32.0
2	高绘菊	山东农业大学林学院	62	577	15.0	22.0
3	张志芳	中国农业科学院生物技术研究所	76	600	14.0	20.0
4	李轶女	中国农业科学院生物技术研究所	52	364	10.0	17.0
5	刘惠芬	山东农业大学林学院	4	14	2.0	3.0
9	王石宝	中国农业科学院生物技术研究所	2	2	1.0	1.0
10	江峰	中国农业科学院生物技术研究所	2	2	1.0	1.0