赖氨酸-尸胺反向转运蛋白cadB基因谷氨酸棒杆菌表达载体的构建及转化

• 作者: 刘萌 周丽颖 孙昕 路福平 黄云雁 黎明
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 尸胺 赖氨酸-尸胺反向转运蛋白CadB 谷氨酸棒杆菌 赖氨酸脱羧酶 共表达
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 94-100
• 分类号: Q782
• 字数: 4309字
• 语种: 中文

摘要

旨在提高谷氨酸棒杆菌合成尸胺的能力,将CadB克隆至谷氨酸棒杆菌中,与LDC共表达,在谷氨酸棒杆菌合成尸胺的同时,帮助尸胺转运至细胞外,解除尸胺的反馈抑制作用.谷氨酸棒杆菌能够高产赖氨酸脱羧酶的底物L-赖氨酸,但不舍Idc和cadB基因,因而不能够直接合成尸胺.从E coli K12中克隆出赖氨酸-尸胺反向转运蛋白基因,与绿色荧光蛋白基因gfp融合构建成融合表达载体pXBG,并转化至谷氨酸棒杆菌进行诱导表达,结果表明表达的CadB蛋白可以正确的定位于谷氨酸棒杆菌的细胞膜上.将基因cadB连接到含有赖氨酸脱羧酶基因的pXMJ19-ldc上,构建成能够共表达赖氨酸脱羧酶和赖氨酸-尸胺反向转运蛋白的重组质粒pXLB,并转化到谷氨酸棒杆菌中.