桉树随机引物PCR反应体系优化研究

• 作者: 卢翠香 叶露 唐庆兰 张照远 邓紫宇 陈健波 项东云
• 来源期刊: 广西林业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桉树 随机引物PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: S792.39
• 字数: 2080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-1126.2012.01.005

摘要

以桉树DNA为模板,采用单因素试验方法研究dNTP浓度、Mg2＋浓度及退火温度对桉树随机引物PCR反应结果的影响。试验结果表明,最优的反应体系为：20μL的PCR反应体积中,10×Buffer2.0μL,Mg2＋（25 mmol/L）1.28μL,dNTP（10 mmol/L）0.4μL,Primer（10μmol/L）2.0μL,Taq（5 U/μL）0.2μL,DNA2.0μL;最优扩增程序：94℃预变性2 min,然后进行35个循环（94℃变性30 s,36℃退火30 s,72℃延伸2 min）,最后72℃延伸10 min。