白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库的构建

• 作者: 冀霞 刘美德 赵彤言 赵瑞君
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白纹伊蚊 蚊媒病毒 T7噬菌体 cDNA展示文库
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 78-83
• 分类号: R38
• 字数: 3913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2012.02.003

摘要

为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因,本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictus T7噬菌体展示cDNA文库,分离与纯化白纹伊蚊mRNA,所得 mRNA经反转录合成双链cDNA后,在双链cDNA 末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头使其两端分别带EcoRⅠ和Hind Ⅲ黏性末端;接着用Mini Column 纯化收集300 bp 以上的双链cDNA 片段连接于T7 Select 10-3b 载体;经体外包装后,以BLT 5403 为受体菌构建T7 噬菌体展示cDNA 文库.所建文库的库容量经测定为1.7×107 pfu/mL,扩增后文库滴度为2.5×1013 pfu/mL.对从原始文库中随机挑取的50个噬菌斑进行PCR 鉴定,重组率为95% 以上;阳性克隆片段长度分布在200～2 000 bp,其中有90%的插入片段大于300 bp.本文所构建的白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库,满足cDNA文库的基本要求,可以用于筛选白纹伊蚊与相关蚊病毒相互作用的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵彤言	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	141	1052	17.0	22.0
2	赵瑞君	山西医科大学病原生物学教研室	43	302	11.0	15.0
3	冀霞	山西医科大学病原生物学教研室	3	6	1.0	2.0
4	刘美德	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	18	111	7.0	9.0