硫酸乙酰肝素3-O硫酸基转移酶5的表达、纯化及酶学性质研究

• 作者: 张旦旦 李会 窦文芳 许正宏 许泓瑜 陈敬华 陕婧婧
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 硫酸乙酰肝素 3-O硫酸基转移酶5 表达 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 101-106
• 分类号: Q936
• 字数: 4816字
• 语种: 中文

摘要

经过PCR克隆得到硫酸乙酰肝素3-0硫酸基转移酶5(3-OST-5)的基因,将其与大肠杆菌表达载体pET-15b连接后,在大肠杆茵BL21( DE3)中诱导表达,使用镍亲和层析柱纯化得到具有活性的3-0ST-5.经测定纯化后的3-OST-5比活达到0.58 U/mg,是纯化前的5.27倍,回收率达80.4％.在此基础上,研究了该酶的酶学性质,酶反应的最适温度为35℃,稳定范围为20--40℃;最适pH为7.0,在pH7.0-9.0范围内稳定.在反应液中加入终浓度为1 mmol/L的K+、Ca2+、Ba2+对酶促反应有一定的促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许正宏	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	241	1740	20.0	30.0
5	窦文芳	江南大学医药学院制药工程研究室	55	278	10.0	13.0
6	许泓瑜	江南大学医药学院制药工程研究室	77	764	14.0	23.0
7	陈敬华	江南大学医药学院制药工程研究室	80	188	8.0	9.0
8	李会	江南大学医药学院制药工程研究室	48	107	6.0	8.0
9	张旦旦	江南大学医药学院制药工程研究室	17	28	3.0	4.0
10	陕婧婧	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0