食管癌细胞抗失巢凋亡基因UBCH7的发现与鉴定

• 作者: 张钰 杨扬 汪晓敏 王博石 王明荣 贾雪梅
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 医学
• 关键词: 失巢凋亡 食管癌(ESCC) 逆转录病毒cDNA文库筛选 UBCH7
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 190-197
• 分类号: R735.1
• 字数: 4121字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.00190

摘要

失巢凋亡(Anoikis)是细胞失去与细胞外基质(Extra-cellular matrix,ECM)粘附时发生的特殊形式的凋亡,是机体维持组织稳态的关键机制之一.抗失巢凋亡能力的获得是肿瘤细胞发生远处转移的前提条件之一.为了鉴定与食管癌细胞抗失巢凋亡相关的基因,文章首先构建食管癌细胞系的逆转录病毒文库,感染对失巢凋亡敏感的NIH3T3细胞,利用感染病毒cDNA文库的混合细胞系进行软琼脂集落形成实验,挑取在悬浮条件下仍可生长成为较大集落的细胞单克隆(潜在具有抗失巢凋亡能力的细胞),通过逆转录病毒载体特异的引物PCR扩增失巢凋亡抗性克隆基因组中的插入cDNA片段,以此获得食管癌细胞系cDNA文库中潜在的具有失巢凋亡抗性的基因.经测序发现其中一个失巢凋亡克隆中整合的cDNA片段包括人UBCH7/UBE2L3基因全长的编码序列(开放阅读框).利用携带pMSCV-UBCH7的逆转录病毒感染NIH3T3细胞进行验证,结果显示细胞失巢凋亡抗性增强,并且在具有高转移潜能的食管癌细胞系MLuC1中降调UBCH7表达可减弱其失巢凋亡抗性.这些结果表明,UBCH7/UBE2L3是一个与食管癌失巢凋亡抗性相关的基因.