PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的人肝L02细胞DNA损伤

• 作者: 张树江 李文 李晓杰 林丽娜 林忠宁 林育纯 罗洁 胡耀明 陈慧峰 陈雯
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白磷酸酶2A (PP2A) 调节亚基B56γ 镉 肝细胞毒性 基因转录调控
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-194
• 分类号: R735.7
• 字数: 4625字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2012.03.006

摘要

目的:探讨人正常肝细胞内蛋白磷酸酶2A-B56γ亚基(PP2A-B56γ,由PPP2R5C基因编码)高表达对镉诱导相关基因转录水平和DNA损伤效应的影响,并探讨其作用机制.方法:构建PP2A-B56 γ高表达L02-2R5Cc和空白载体对照L02-pBabe细胞模型；两种细胞分别给予CdCl2(Cd)、TNFα单独处理及联合处理后,实时荧光定量-PCR(QRT-PCR)检测不同处理组PPP2R5C和金属硫蛋白1B (MT1B) mRNA转录水平；彗星试验(SCGE)检测细胞DNA断裂损伤情况；并按照3×2的析因设计分析不同处理之间是否存在联合作用及作用类型.结果:与L02-pBabe细胞相比较,L02-2R5Cc细胞中PPP2R5C、外源性PPP2R5C-FLAG mRNA显著高表达(P＜0.05),细胞株构建成功.3种因素单独处理时,与阴性对照组相比,Cd降低PPP2R5C、升高MT1B mRNA表达,PPP2R5C基因高表达诱导的效应与Cd处理相反,TNFα降低PPP2R5C和MT1B mRNA表达(均P＜0.05)；析因分析表明,在PPP2R5C和PPP2R5C-FLAG mRNA检测中,PPP2R5C高表达与Cd、与TNFα之间均存在协同性交互效应(P＜0.05)；在MT1B mRNA检测中,PPP2R5C高表达与Cd和TNFα之间均表现为拮抗作用,PPP2R5C高表达与TNFα为协同抑制作用(均P＜0.05).SCGE检测表明,与阴性对照相比,Cd诱导彗星尾长、尾矩、尾部DNA含量和拖尾细胞阳性率显著增高(P＜0.05),TNFα、PPP2R5C高表达单独作用均不引起DNA损伤(P＞0.05),但两两联合作用的析因分析结果表明,TNFα预处理与Cd处理对DNA损伤具有协同作用,PPP2R5C高表达与Cd处理存在拮抗作用,交互作用均具有统计学意义(P＜0.05).结论:Cd抑制肝细胞PPP2A-B56γ编码基因的转录并显著诱导DNA损伤,PP2A-B56γ高表达抑制镉诱导的DNA损伤,而炎症因子可增强镉对细胞DNA的损伤.