沉默信息调节蛋白6基因重组腺病毒的构建及其在HepG2细胞中的表达

• 作者: 傅玉才 周小辉 孙宁
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒 沉默信息调节蛋白6基因 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 82-85,封3
• 分类号: R318
• 字数: 3412字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建高表达小鼠沉默信息调节蛋白6(SIRT6)基因的重组腺病毒Ad-SIRT6,并在HepG2细胞中验证其表达.方法:通过PCR获取SIRT6基因编码序列,克隆入pAd-Track-CMV载体质粒中；将重组质粒PmeⅠ线性化处理后与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同电转入大肠杆菌BJ5183中,获得Ad-SIRT6质粒pAd-SIRT6；用PacⅠ线性化处理后,转染Ad293细胞,包装获得Ad-SIRT6.用该病毒感染HepG2,进行RT-PCR及Westem blot验证目的基因的表达.结果:pAd-Track-CMV-SIRT6测序结果正确；pAd-SIRT6转染Ad293后,扩增并纯化得Ad-SIRT6;转染HepG2后,经RT-PCR及Western blot验证,可表达外源性SIRT6基因,且SIRT6总蛋白表达量增高(P＜0.05).结论:成功构建可高表达SIRT6基因的Ad-SIRT6,为进一步研究SIRT6基因在肝糖脂代谢中的作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅玉才	汕头大学医学院细胞衰老实验室	115	556	12.0	18.0
2	周小辉	汕头大学医学院第一附属医院感染科	23	96	6.0	9.0
3	孙宁	汕头大学医学院第一附属医院感染科	1	0	0.0	0.0