治疗性超声介导微泡破裂促进大鼠体内肌肉基因转染的参数优化实验研究

• 作者: 唐远姣 张凌燕 文晓蓉 林玲 王磊 邱逦
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 超声介导微泡破裂 基因转染 肌肉 参数优化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 930-935
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨治疗性超声介导微泡破裂促进基因体内转染大鼠肌肉的最适合的转染条件.方法 在大鼠双侧胫前肌内局部注射微泡与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒混合物,应用不同输出功率、不同占空比及不同超声辐照时间的治疗性超声辐照胫前肌,分别用肌肉局部注射及静脉注射微泡和质粒联合超声辐照,根据荧光染色及免疫组化染色下EGFP表达结果判断转染效果,根据转染效果最好且HE染色下肌肉损伤最小选出最适合的超声辐照条件和最适合的注射方式.将大鼠分为4组:①超声辐照+微泡+质粒组,②微泡+质粒组,③超声辐照+质粒组,④单纯质粒组.选取最适辐照及注射方式后,将大鼠在超声辐照后5d处死,荧光染色及免疫组化染色下观察肌肉EGFP表达情况,HE染色观察肌肉损伤情况.结果 在1 MHz治疗性超声辐照下,输出功率2 W/cm2,占空比20％,超声辐照3 min的最适合的辐照条件下,肌肉EGFP表达明显,且无明显损伤.肌肉局部注射较静脉注射更适合.荧光染色和免疫组化染色示4组中超声辐照+微泡+质粒组肌肉EGFP表达高于其余3组,微泡+质粒组高于其余2组(P＜0.05).HE染色下未见超声辐照及微泡造成的肌肉损伤.结论 在适合转染条件下,治疗性超声联合微泡能明显增强基因体内转染大鼠肌肉的效率,且不损伤肌肉细胞,可作为基因治疗的一种安全有效的非病毒性基因转染方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文晓蓉	四川大学华西医院超声科	60	173	7.0	10.0
2	王磊	四川大学华西医院超声科	119	709	16.0	22.0
3	邱逦	四川大学华西医院超声科	118	406	11.0	17.0
4	唐远姣	四川大学华西医院超声科	28	108	5.0	10.0
5	张凌燕	四川大学华西医院超声科	14	133	4.0	11.0
6	林玲	四川大学华西医院超声科	62	307	9.0	16.0