桑树Ca2+/H+反向转运体基因MCAX-1的克隆及序列与表达分析

• 作者: 刘赵越 张英华 方荣俊 李龙 童伟 赵卫国
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桑树 Ca2+/H+反向转运体蛋白 基因克隆 序列特征 基因表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 192-198
• 分类号: S888.2|Q943.2
• 字数: 5001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2012.02.002

摘要

植物体内的Ca2+/H+反向转运体在Ca2+介导的营养和信号转导中发挥着重要作用.选择桑树幼叶cDNA文库中功能注释为Ca2+/H+反向转运体基因(CAX)的一条EST序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)与反转录PCR( RTPCR)在桑品种育71-1的幼叶中克隆获得该基因的全长cDNA序列,命名为MCAX-1(GenBank登录号:JN716318).序列分析显示:MCAX-1全长1 784 bp,包括197 bp的5’端非翻译序列和243 bp的3’端非翻译序列,含有一个1 344bp的完整ORF,编码447个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量为47.93 kD,等电点为5.67.构建的桑树和其它植物基于CAX蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树与盐地碱蓬(Suaeda salsa)、毛果扬(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)等有较近的亲缘关系.半定量RT-PCR分析表明:MCAX-1在桑树幼芽、嫩叶、根和幼花中的表达量较高,在韧皮部、木质部和成熟果实中的表达量较低；MCAX-1在低温胁迫下的表达量减少,-1℃时几乎无表达,在干旱胁迫下的表达量随着胁迫时间延长逐渐达到最大值之后又迅速降低,在盐分胁迫初期的表达量无变化,但胁迫18d时表达量明显降低.初步推测MCAX-1与桑树的抗逆性能有一定关联.